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Doctorat
Tunisie
Thèse soutenue
2019
Isolement et étude de souches fongiques thermotolérantes productrices de laccases à partir de sols des régions arides du sud Tunisien : Essais d’application en bioremédiation
Titre : Isolement et étude de souches fongiques thermotolérantes productrices de laccases à partir de sols des régions arides du sud Tunisien : Essais d’application en bioremédiation
Auteur : MTIBAA Rim
Etablissement de soutenance : Ecole Nationale d’Ingénieurs de Sfax
Grade : Doctorat Génie Biologique 2019
Résumé
La transformation et la détoxification des polluants organiques
récalcitrants par de nouveaux champignons puissants font l’objectif de plusieurs
travaux scientifiques. Dans ce contexte, des souches fongiques ont été isolée à
partir des régions de sols arides. Une collection de 13 souches thermotolérantes
dotées d’activité laccase a été élaborée. L’étude phylogénétique montre que ces
isolats appartiennent à l’embranchement des ascomycètes et sont divisés en deux
genres et en différentes espèces. La souche Thielavia sp HJ22 a été retenue pour
le reste du travail vu l’activité importante de sa laccase. Une optimization de sa
production laccase a été réalisé en utilisant la conception de Box-Behnken. Une
amélioration de 8 fois l’activité initiale a été atteinte. Une purification à
homogénéité de sa laccase, produite en milieu optimisé, a été obtenue avec un
rendement de 12% et un facteur de purification de 90,57. La laccase purifiée est
caractérisé comme laccase blue de masse moléculaire de 70 kDa. L’analyse par
MALDI-TOF a indiqué que cette enzyme possède une identité maximale de
99% à une laccase de la souche Thielavia arenaria 3PPS. Dans la dernière partie
de cette thèse, nous avons étudiés la capacité de certaines souches isolées y
compris la souche Thielavia sp HJ22 dans la dégradation des composés
organiques présents dans tous les do maines industriels et environnementaux, à
savoir les EDCs (nonylphénol, 4-tert-octylphénol et Bisphénol A) et les
chlorophénols (2,4-dichlorophénol). Nous avons pu démontrer que l’application
de ces souches a donné des résultats satisfaisants donnant lieu à des
transformations rapides et complètes catalysées par les laccases et les
monooxygénases du cytochrome P450. Les voies métaboliques ont été
suggérées suite à l’identification des produits de transformation par HPLC-ESIMS. L’effet détoxifiant des souches a été prouvé en utilisant le test biologique
Microtox.
Mots clés : Ascomycètes, isolement, laccases, monooxygénases du cytochrome P450, purification, caractérisation, optimisation, biotransformation, biosorption, polluants organiques, détoxification.
Page publiée le 30 mars 2021