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Université de Cordoba (2010)

Optimización de un protocolo para la identificación de variedades de olivo a partir de ADN extraído de la pulpa de aceitunas frescas y aderezadas

Mahious Ali

Titre : Optimización de un protocolo para la identificación de variedades de olivo a partir de ADN extraído de la pulpa de aceitunas frescas y aderezadas

Auteur : Mahious Ali

Université de soutenance : Université de Cordoba
Le programme du Master est organisé conjointement par Universidad de Córdoba (UCO), Consejería de Agricultura, Pesca y Medio Ambiente de la Junta de Andalucía (CAP), Instituto Andaluz de Investigación y Formación Agraria, Pesquera, Alimentaria y de la Producción Ecológica (IFAPA), Centre International de Hautes Etudes Agronomiques Méditerranéennes (CIHEAM) à travers l’Institut Agronomique Méditerranéen de Zaragoza (IAMZ), Consejo Superior de Investigaciones Científicas (CSIC) et Instituto Nacional de Investigación y Tecnología Agraria y Alimentaria (INIA)

Grade : Master Universitaire en Oliviculture et Oléotechnie 2010

Résumé
Actualmente, el consumo de aceituna de mesa ha crecido significativamente paralelo al aumento de la producción. Como resultado se comercializan grandes volúmenes de aceituna de mesa de las variedades de los países productores de todo el mundo. Las empresas comercializadoras en ocasiones utilizan la denominación de aceituna española para introducir su producto en países importadores donde la aceituna de mesa tiene una imagen de calidad. Esta situación supone un claro perjuicio tanto para la industria de aceituna de mesa española, para el consumidor que recibe un producto no auténtico. En el presente trabajo, se ha puesto a punto la extracción y amplificación de ADN a partir de pulpa de aceituna fresca y aderezada mediante dos protocolos estandarizados, rápidos y de fácil aplicación. Por una parte se analizó la pulpa de aceitunas frescas de las 47 variedades más utilizadas como aceituna de mesa a nivel mundial incluidas en el Banco Mundial de Germoplasma de Olivo de Córdoba. Los análisis para cada variedad se realizaron en tres estados de maduración del fruto (verde, envero y rojo-violeta) con el fin de comprobar su influencia en la cantidad y calidad del ADN extraído. El análisis de ADN de estas muestras se realizó mediante la aplicación de un conjunto de 12 marcadores tipo SSR. El protocolo ‘DNeasy Mini’ (Qiagen, Madrid) permitió extraer ADN de los frutos frescos en cantidad y calidad suficiente sin apreciarse influencia significativa del estado de maduración. Los perfiles genéticos SSR obtenidos a partir de ADN de la pulpa de frutos frescos fueron iguales a los obtenidos a partir de ADN de hojas de las mismas variedades. Se observó un alto nivel de polimorfismo en el conjunto de marcadores SSR seleccionados. El marcador mas polimórfico fue DCA09 mientras que el marcador DCA05 resulto poco útil en la identificación varietal. Por otra parte, aplicando los protocolos de amplificación y extracción de ADN optimizados en este estudio se han autentificado13 muestras comerciales de aceituna de mesa para las que se han obtenido los mismos perfiles SSR en pulpa de aceituna no aderezada y en tejido de hoja. Se ha obtenido amplificación para 7 marcadores SSRs de un total de 12 ensayados. Los 5 SSRs restantes requieren una mayor optimización en las condiciones de amplificación de PCR. Aunque el ADN extraído a partir de pulpa aderezada en negro artificial presenta menor calidad no impide su amplificación. La identificación molecular de las aceitunas aderezadas fue confirmada con el estudio de sus endocarpos permitiendo confirmar que la denominación comercial coincidía con su identidad varietal real.

Résumé en Espagnol – Anglais

Source : Master of Oliviculture et Oleotechnie

Page publiée le 8 décembre 2015, mise à jour le 25 juin 2018