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Universidad de Granada (2012)

VARIABILIDAD MORFOLOGICA, ISOENZIMATICA E HISTOLOGICA DEL ARGAN (ARGANIA SPINOSA L.) Y DE SU ACEITE AN LA REGION DE CHOUIHIYA (BERKANE, MARRUECOS). CONTRIBUCION A SU PROPAGACION IN VITRO

ALLACH, MARIAM

Titre : VARIABILIDAD MORFOLOGICA, ISOENZIMATICA E HISTOLOGICA DEL ARGAN (ARGANIA SPINOSA L.) Y DE SU ACEITE AN LA REGION DE CHOUIHIYA (BERKANE, MARRUECOS). CONTRIBUCION A SU PROPAGACION IN VITRO

Auteur : ALLACH, MARIAM

Université de soutenance : Universidad de Granada

Grade : Tesis Doctoral 2012

Résumé
El argán (Argania spinosa L. Skeels) es un árbol endémico de Marruecos, con un gran impacto socioeconómico en la zona por sus múltiples usos, que incluyen especialmente la alimentación ganadera a partir de sus frutos, y la extracción de un aceite de excelentes cualidades alimentarias y terapéuticas. La especie se encuentra sin embargo en estado de amplia regresión debido especialmente a la sobreexplotación. Es por otra parte escasa la literatura científica que analiza los diversos aspectos de la biología de la especie y sus potenciales aplicaciones. Con objeto de analizar la variabilidad morfológica del argán de las regiones Noroeste de Marruecos (Chouihiya, provincia de Berkane) y del Suroeste (Agadir), se ha realizado una prospección de los ejemplares presentes, que han sido caracterizados atendiendo a un modelo morfológico clásico de discriminación de variedades de olivo, adaptado convenientemente al argán. El análisis de numerosos parámetros del árbol, la hoja, el fruto y el endocarpo ha permitido explorar la gran variabilidad de esta planta, y diferenciar 6 subespecies/variedades, denominadas argán (genérico), argán de árbol pequeño, argán de fruto alargado, argán de hojas pequeñas, argán de fruto apuntado, argán de fruto grande y argán sin fruto. Los estudios morfológicos han sido extendidos con análisis de la compleja fenología floral de esta planta, y de un estudio pionero micromorfológico y ultraestructural del grano de polen, que ha permitido establecer diferencias entre las subespecies/variedades analizadas. Además de los marcadores morfológicos descritos, se han utilizado dos tipos de marcadores isoenzimáticos (superoxido dismutasa -SOD-, y actividades esterasas inespecíficas) en diferentes tejidos de la planta, así como proteínas de almacenamiento de semillas para identificar la posible presencia de polimorfismos en el germoplasma de la especie. En el caso de las SODs han sido identificadas diferentes isoenzimas, que han sido caracterizadas como Cu,Zn-SODs y Mn-SODs mediante la utilización de inhibidores específicos en ensayos de actividad en gel. Estos ensayos así como las medidas espectrofotométricas de actividad han permitido definir perfiles de actividad característicos para las distintas variantes morfológicas observadas. En el caso de las esterasas, han sido identificadas multitud de bandas, que igualmente poseen un carácter discriminatorio entre subespecies/variedades. Por primera vez han sido identificadas proteínas de almacenamiento de semillas (SSPs) de tipo 11S, similares a leguminas, en los tejidos de la semilla de argán. La identificación se basa en los perfiles proteicos obtenidos mediante SDS-PAGE para el cotiledón y el endospermo de la semilla, en condiciones a) desnaturalizantes y b) desnaturalizantes y reductoras, así como en la reacción cruzada frente a un anticuerpo desarrollado frente a las SSPs de tipo 11S del olivo. Los perfiles obtenidos han servido para generar un modelo de la distribución de las subunidades detectadas, compuestas por 5 péptidos diferentes de menor tamaño, asociadas en hasta 3 combinaciones distintas ¿/ß formadas por una ¿- proteína con Ip ácido de mayor tamaño combinada con una ß-proteína menor de carácter más básico, unidas por puentes disulfuro. Las SSPs se encuentran masivamente presentes en los tejidos de la semilla de argán en forma de cuerpos proteicos estrechamente relacionados metabólica y estructuralmente con cuerpos lipídicos. Se trata de componentes altamente nutricionales de la semilla, que probablemente estén igualmente presentes en el aceite. Han sido analizados parámetros bioquímicos esenciales (composición en ácidos grasos, esteroles y capacidad antioxidante) del aceite de argán de distintas procedencias geográficas y varietales. La primera característica notable de los aceites analizados es su alta variabilidad, en consonancia con datos disponibles en la literatura. En general se trata de aceites con elevado contenido en ácidos grasos oleico y linoleico, y bajo contenido en ácidos grasos saturados como palmítico y esteárico, así como en colesterol. También contienen niveles muy altos de tocoferoles delta y gamma. La estabilidad de los aceites es sin embargo escasa, lo que afecta su calidad especialmente en términos de índice de peróxidos, lo que hace que gran parte de los aceites analizados se cataloguen en las categorías inferiores de la norma marroquí. Con la finalidad de contribuir al desarrollo de métodos eficientes de propagación del argán en la naturaleza, han sido optimizados diversos procedimientos de cultivo ex vitro e in vitro de la semilla, alternativos a los existentes. En el caso del cultivo in vitro, ha sido optimizado un método que incluye el empleo de medio de cultivo con baja salinidad, y la adición de diversas giberelinas, que han permitido obtener tasas relevantes de germinación y enraizamiento, así como buenos niveles de enraizamiento secundario, adecuados para el trasplante. Este sistema ha permitido además, la realización de un extensivo análisis histológico y estructural de la germinación in vitro en esta planta.

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Page publiée le 7 novembre 2017